土壤無機磷（soil inorganic phosphorus，S-PHOS）含量試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

磷是植物必需大量元素。植物主要通過根系從土壤中獲取磷元素。土壤磷包括有機磷和無機磷。土壤有機磷經過礦化分解而轉化為無機磷，才能進一步被植物吸收利用。

測定原理：

從土壤中提取無機磷，在酸性環境中，通過鉬藍法定磷，即可計算出無機磷含量。

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試劑組成和配制：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用；

試劑三：粉劑×1 瓶， 4℃避光保存。臨用前配制，加入 20 ml 蒸餾水，充分溶解后加入 10 ml 試劑二，混勻；

標準品：液體×1 支，20 μmol/L 無機磷標準液，4℃保存。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

自備儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、可調式水浴鍋，分析天平、可調式移液器、1ml 玻璃比色皿、蒸餾水和 100 目篩子。

土壤無機磷提取：

取 10 ml 離心管，加入精確稱取的 100 目篩子過篩的風干土樣約 0.1g，加入 10 ml 提取液，震蕩混勻，然后置于 40℃水浴浸提 1 h，8000g，25℃，離心 10min，取上清液，待測。

測定步驟：

1. 分光光度計預熱 30 min，調節波長到 660 nm，蒸餾水調零。

2. 打開水浴鍋，調節溫度到 40℃。

3. 空白管：取EP 管，依次加入 500μl 蒸餾水，500μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 空白管。

4. 標準管：取EP 管，依次加入 50μl 標準液，450μl 蒸餾水，500μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 標準管。

5. 測定管：取EP 管，依次加入 50μl 上清液，450μl 蒸餾水，500μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 測定管。

需在 40min 內完成比色。

土壤無機磷含量計算公式：

S-PHOS（nmol/d /g 干重）= [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總÷W

= 200×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W

C 標準液：20 μ mol/L；V 總：總上清液體積，10 ml=0.01 L；W：土壤樣品質量，g。

注意事項：

1、空白管和標準管只需測定一次。

2、試劑三需臨用前配制，限當天使用。試劑三配制過程中，可能會產生黑色固體，其不影響結果，注意吸取時不要將黑色固體吸入。

3、40min 內完成比色。

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